背景说明
Cell Counting Kit-8(简称CCK-8试剂盒)是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测试剂盒。WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下,可被线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产物(formazan)。生成的甲臜物数量与活细胞数量成正比。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值(OD值),可间接反映活细胞数量,细胞增殖越多越快,颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。
图 CCK-8检测原理图
服务流程
客户在线下单——订单/实验材料确认——细胞处理——CCK-8孵育——OD值测定——出具实验报告——结果交付
服务内容及说明
适用范围
该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。
客户下单及项目信息填写
在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录,请客户按照页面提示填写项目名称、选择项目类型、填写个人信息及联系方式,提交项目所需要的具体信息,包括:
1、细胞类型与名称;
2、检测时间节点;
3、尽可能丰富的相关资料、文献。
实验信息
实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户,并发送实验报告查看网址。实验结题后,实验报告、检测结果可在线查看或打印,并永久保留。
实验周期
致电详询
实验交付内容
1、所有实验的原始数据(包括实验过程、实验试剂与设备等);
2、实验剩余药物、试剂等;
3、检测报告与结果分析(酶标仪下机数据、结果统计分析等)。
CCK-8的优点
1、产生的甲瓒产物是水溶性的,可减小实验误差;
2、不需要放射性同位素和有机溶剂,对细胞的毒性小;
3、重复性优于MTT法;
4、检测试剂无需预制,即开即用;
5、灵敏度高,线性范围宽,数据可靠,重复性好;
6、操作简便,省时省力;
7、适合于高通量药物筛选。
CCK-8的缺点
1、与MTT法相比,CCK-8价格较贵;
2、试剂的颜色为淡红色,与含酚红的培养基颜色接近,操作过程中容易漏加或多加。
文献示例
图 CCK-8检测细胞活力(Bian et al., 2021)
参考文献
Bian E, Chen X, Cheng L, et al. Super-enhancer-associated TMEM44-AS1 aggravated glioma progression by forming a positive feedback loop with Myc. J Exp Clin Cancer Res. 2021;40(1):337.