背景说明
MTT(3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide)是一种接受氢离子的黄色化合物,而MTT法是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。
二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲臜,用酶联免疫检测仪在570nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定的细胞数量范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的光吸收值(OD值)来判断活细胞数量,OD值越大,细胞数量越多或活性越强(如果是测药物毒性,则表示药物毒性越小)。
图 活细胞中MTT四唑盐还原为甲臜示意图(Buranaamnuay K. 2021)。
服务流程
客户在线下单——订单/实验材料确认——细胞处理——MTT染液制备——MTT孵育——DMSO溶解——OD值测定——出具实验报告——结果交付
服务内容及说明
适用范围
该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。
客户下单及项目信息填写
在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录,请客户按照页面提示填写项目名称、选择项目类型、填写个人信息及联系方式,提交项目所需要的具体信息,包括:
1、细胞类型与名称;
2、检测时间节点;
3、尽可能丰富的相关资料、文献。
实验信息
实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户,并发送实验报告查看网址。实验结题后,实验报告、检测结果可在线查看或打印,并永久保留。
实验周期
致电详询
实验交付内容
1、所有实验的原始数据(包括实验过程、实验试剂与设备等);
2、检测报告与结果分析(酶标仪下机数据、结果统计分析等);
3、具体实验报告。
MTT法的优点
灵敏度高、经济实惠。
MTT法的缺点
1、MTT经还原所产生的甲瓒产物不溶于水,需被溶解后才能检测,不仅增加工作量,还影响实验结果的准确性;
2、溶解甲瓒的有机溶剂带有毒性。
参考文献
Buranaamnuay K. The MTT assay application to measure the viability of spermatozoa: A variety of the assay protocols. Open Vet J. 2021;11(2):251-269.