背景说明
流式细胞术（flow cytometry，FCM）是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术，它是集激光技术、光电测量技术、计算机技术、流体力学以及细胞免疫荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技细胞分析技术。流式细胞仪是应用流式细胞术建立起来的仪器装置。
在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine，PS）分布于细胞膜脂质双层的内侧，但在细胞发生凋亡早期，膜PS由脂膜内侧翻向外侧，暴露在细胞外环境中。Annexin V是一种分子量为35~36KDa的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，可与PS高度亲和并特异性结合，被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。但Annexin V无法区分坏死细胞（中晚期凋亡细胞）和早期凋亡细胞。
碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一种核酸染料，不能透过完整细胞膜，但由于凋亡中晚期细胞和死细胞的细胞膜通透性增加，PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。早期凋亡细胞和活细胞的细胞膜仍然完整，PI无法进入凋亡细胞。
将Annexin V与PI联合使用，即可将处于不同凋亡时期的细胞区分开来：活细胞（Annexin V-/PI-）、早期凋亡细胞（Annexin V+/PI-）、晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被Annexin V和PI结合染色呈现双阳性（Annexin V+/PI+）。
图 Annexin V/PI检测原理
服务流程
客户在线下单——订单/实验材料确认——细胞培养——细胞处理——细胞收集——Annexin V孵育——PI孵育——流式细胞仪分析——出具实验报告——结果交付
服务内容及说明
适用范围
检测外界刺激（如药物处理）对细胞的影响。
客户下单及项目信息填写
在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录，请客户按照页面提示填写项目名称、选择项目类型、填写个人信息及联系方式，提交项目所需要的具体信息，包括：
1、细胞类型与名称；
2、检测时间节点；
3、尽可能丰富的相关资料、文献。
实验信息
实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户，并发送实验报告查看网址。实验结题后，实验报告、检测结果可在线查看或打印，并永久保留。
实验周期
致电详询
Annexin V/PI双染色法的优点
1、简便、快速；
2、可准确区分活细胞、凋亡细胞和坏死细胞。
Annexin V/PI双染色法的缺点
1、制备贴壁细胞样品时，容易因消化和吹打造成细胞额外损伤，从而夸大了实验结果，增加了数据变异度。
2、凋亡细胞的本底荧光或非特异染色的特性会增强，导致荧光飘移，导致定量不准。
实验交付内容
1、所有实验的原始数据（包括实验过程、实验试剂与设备等）；
2、检测报告与结果分析（流式细胞仪下机数据、结果统计分析等）；
3、具体实验报告。
文献示例
图 流式细胞仪检测细胞凋亡情况（Chen et al., 2021）。
参考文献
Chen J, Chen X, Fu L, Chen J, Chen Y, Liu F. LncRNA GACAT1 targeting miRNA-149 regulates the molecular mechanism of proliferation, apoptosis and autophagy of oral squamous cell carcinoma cells. Aging (Albany NY). 2021;13(16):20359-20371.
