背景说明
Hoechst可与DNA双链中的小沟(minor groove)结合,且更倾向于富含A/T的DNA链,可穿过细胞膜,其在凋亡细胞中的荧光强度要比正常细胞中高,这与凋亡细胞的细胞膜通透性增强有关,因此进入凋亡细胞中的Hoechst染料要比正常细胞多。
Hoechst染液不仅可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。此外,Hoechst也可与碘化丙啶(propidium iodide,PI)结合,对细胞进行双重染色,之后可通过荧光显微镜拍照或流式细胞仪检测,以区别凋亡、坏死及正常细胞。
服务流程
客户在线下单——订单/实验材料确认——细胞培养——细胞固定——Hoechst染液孵育——可选PI双染——荧光显微镜拍照(或流式细胞仪检测)——出具实验报告——结果交付
服务内容及说明
适用范围
细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。
客户下单及项目信息填写
在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录,请客户按照页面提示填写项目名称、选择项目类型、填写个人信息及联系方式,提交项目所需要的具体信息,包括:
1、细胞类型与名称;
2、所选染液具体名称编号与检测方法;
3、尽可能丰富的相关资料、文献。
实验信息
实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户,并发送实验报告查看网址。实验结题后,实验报告、检测结果可在线查看或打印,并永久保留。
实验周期
致电详询
实验交付内容
1、所有实验的原始数据(包括实验过程、耗材、实验试剂与设备等);
2、检测报告与结果分析(可选流式细胞仪检测数据(限细胞水平)、荧光图,以及结果统计分析等);
3、包埋、染色片(限客户提供组织)。
Hoechst染色的优点
1、无需用DAB显色,它直接结合细胞的DNA,经过紫外光激发后发出蓝色荧光;
2、可进行活细胞染色;
3、操作简单、便捷。
Hoechst染色的缺点
1、荧光染料存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测,活细胞或组织染色后需立即观察;
2、Hoechst染液对人体有害,需注意适当防护。
文献示例
图 Hoechst 33342染色检测细胞凋亡形态特征(Wang et al., 2020)
参考文献
Wang A, Jiang H, Liu Y, et al. Rhein induces liver cancer cells apoptosis via activating ROS-dependent JNK/Jun/caspase-3 signaling pathway. J Cancer. 2020;11(2):500-507.