背景说明
RANKL是促进破骨细胞最终分化成熟及其功能活性最重要的因子，M-CSF可诱导RANK在破骨细胞前体的细胞膜上表达，进而使表达RANK的破骨前体细胞和RANKL结合并产生效应，诱导破骨细胞分化。因此在体外诱导破骨细胞分化过程中RANKL和M-CSF两种细胞因子缺一不可。形态上，OC直径为100μm，含有2~50个紧密堆积的核，主要分布在骨质表面、骨内血管通道周围，由多个单核细胞融合而成，胞浆嗜碱性，随着细胞老化，渐变为嗜酸性；生物化学和组织化学上，高表达的抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase）和组织蛋白酶K（cathepsin K）是OC的主要标志。
骨重建过程包括OC贴附在旧骨区域，分泌酸性物质溶解矿物质，分泌蛋白酶消化骨基质，形成骨吸收陷窝；其后，OB移行至被吸收部位，分泌骨基质，骨基质矿化而形成新骨，也就是说，骨的生长需要OC与OB作用的相互平衡。OB分化过程受遗传因素、激素水平及细胞调控因子的影响与调控，其主要影响因子有CBF-α1、维生素D受体、降钙素、TGF-β、BMP-21T、糖皮质激素等等。形态上，活跃的OB为梭形、锥形或立方形，胞浆嗜碱性，细胞核位于细胞的一端，核仁明显，表面有短的突起与相邻细胞连接，电镜下胞浆内具有典型的蛋白合成结构——丰富的粗面内质网及核糖体，高尔基体较发达；生物化学和组织化学上，OB富含碱性磷酸酶（alkalinephosphatase，ALP），并有糖元存在，Ⅰ型腔原和一些非胶原蛋白是OB分化的标记物，能反映OB分化表型特征（Yang et al., 2021）。
服务流程
客户在线下单——订单/实验材料确认——MSCs（OB）/巨噬（OC）分离、鉴定——细胞培养——调整细胞状态——细胞定向诱导分化——诱导后的细胞活力鉴定——细胞诱导鉴定（可选RT-PCR、Western 阿blot、化学染色、免疫荧光、电镜观察等方式）——出具实验报告——结果交付
服务内容及说明
适用范围
骨细胞功能的异常会造成骨质吸收异常，导致骨质相关疾病的发生。其中相应信号通路的研究为研制靶向OC/OB分化和功能的新药提供了新方向；还可通过研究OC/OB了解骨质形成的相关机制；此外，免疫细胞在OC/OB分化过程中作用机制复杂，催生了骨免疫学；再者，研究OC/OB在可吸收生物材料中的功能机制对组织工程也有相当大的前景。
客户下单及项目信息填写
在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录，请客户按照页面提示填写项目名称、选择项目类型、填写个人信息及联系方式，提交项目所需要的具体信息，包括：
1、细胞名称与检测方式；
2、细胞处理方式及实验条件参数设置；
3、尽可能丰富的相关资料、文献。
实验信息
实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户，并发送实验报告查看网址。实验结题后，实验报告、检测结果可在线查看或打印，并永久保留。
实验周期
致电详询
实验交付内容
1、所有实验的原始数据（包括实验过程、实验试剂与设备等）；
2、细胞鉴定结果（可提供qRT-PCR所有数据、Western blot胶图及灰度分析结果、免疫荧光图、化学染色结果、电镜图片等）；
3、具体实验报告。
文献示例
图 茜素红S（ARS）染色的骨细胞形态。（a,b）200×和400×倍镜下观察OB，呈亮红色和椭圆形梯形形态，且存在大量胞外钙沉积；（c）400倍镜下观察OC，无细胞外钙沉积，较大的多核细胞成簇而不是单个出现（Shaban et al., 2021）。
参考文献
Shaban NZ, Kenawy MY, Taha NA, et al. Synthesized Nanorods Hydroxyapatite by Microwave-Assisted Technology for In Vitro Osteoporotic Bone Regeneration through Wnt/β-Catenin Pathway. Materials (Basel). 2021;14(19):5823.
Yang W, Li HY, Wu YF, et al. ac4C acetylation of RUNX2 catalyzed by NAT10 spurs osteogenesis of BMSCs and prevents ovariectomy-induced bone loss. Mol Ther Nucleic Acids. 2021;26:135-147.
