背景说明
细胞结构复杂精巧且高度有序,根据功能和空间分布的不同,细胞可以进一步划分为不同的细胞区域或细胞器,即亚细胞,其结构只能通过电子显微镜才能观察。常见哺乳动物亚细胞有细胞核、细胞膜、内质网、高尔基体、过氧化物酶体、线粒体等。每种亚细胞中都存在一组特定的蛋白质,亚细胞结构为这些蛋白质行使功能提供了相对独立的生命活动场所。蛋白质在细胞质中经过翻译并合成,由蛋白质分选信号引导而被转运到特定的亚细胞中以参与细胞的各种生命活动,这一过程就称为蛋白质亚细胞定位。
GFP、RFP等荧光蛋白因其独特的荧光性质和灵敏性,常作为报告基因研究并分析基因产物在细胞中的定位和相互作用等。将目标蛋白与荧光蛋白的N端或者C端融合,通过瞬时转化技术或稳定遗传转化技术,使得该融合蛋白在受体材料细胞内表达,目标蛋白会牵引荧光蛋白一起定位到目标细胞器,通过显微镜观察荧光蛋白在细胞内显示的位置,确定目标蛋白的位置,从而确定目标蛋白的亚细胞定位情况。
我司亚细胞定位载体为商品化载体,可提供细胞核、细胞膜、内质网、高尔基体、过氧化物酶体、线粒体等常见细胞器的亚细胞定位服务,也可依据客户需求提供个性化定制服务。
图 哺乳动物细胞的各细胞器(Davies K., 2020)。
我司原始细胞亚定位载体列表,可根据不同的需求,选择不同的荧光蛋白,插入不同的位置。
服务流程
客户在线下单——订单/实验材料确认——CloneCAD实验设计——基因克隆或全基因合成——亚细胞定位载体构建——细胞转染——使用激光共聚焦显微镜拍摄照片——出具实验报告
服务内容及说明
适用范围
1、为明确基因功能提供信息;
2、推测蛋白质的生物学功能。
客户下单及项目信息填写
在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录,请客户按照页面提示填写细胞种属、细胞名称、载体抗性、载体名称等信息,价格由系统自动计算。
实验信息
在实验开始、结题关键节点系统会自动发送短信到申请人手机进行告知,实验过程中客户可以随时登录客户管理系统査看项目实时进展情况。实验结题后,实验报告、检测结果可在线査看,并永久保留。实验过程用到的菌株、载体、受体材料免费为客户保存半年后销毁。
实验周期
致电详询
实验交付内容
1、所有实验的原始数据(包括实验过程、实验试剂与设备等);
2、重组载体的全序列信息和注释信息;
3、重组载体的酶切图谱;
4、重组载体的测序结果;
5、重组载体:一份质粒、一份大肠杆菌菌液(25%甘油菌);
6、常规定位提供实验组和阳性对照组的荧光图、明场图、叠加图;共定位提供实验组和阳性对照组的荧光图、Marker荧光图、明场图、叠加图。
案例展示
图 我司亚细胞定位部分案例展示
参考文献
Davies K. Biological basis of child health 1: understanding the cell and genetics. Nurs Child Young People. 2020;32(3):33-43.