背景说明

背景说明

针对目标区域体外制备脱硫生物素标记的特异性DNA探针,使其与待测蛋白液孵育,可与偶联在磁珠上的链霉亲和素结合,形成“生物素化DNA-蛋白质”复合物。生物素与链霉亲和素间的作用是目前已知强度最高的非共价作用,采用链霉亲和素磁珠将靶DNA及其结合蛋白从待测蛋白液中分离出来,洗涤后,将非特异性结合蛋白去除,最后,经洗脱液洗脱,得到目的DNA探针-蛋白质复合物,通过western blot检测洗脱液中是否有待测蛋白;通过LC-MS/MS技术检测靶DNA的潜在结合蛋白并鉴定蛋白质类型。

图 DNA Pull-down流程图

服务流程

服务内容及说明

服务内容及说明

适用范围

1、验证已知DNA与蛋白的相互作用;

2、筛选与已知DNA相互作用的未知蛋白。

DNA Pull-down的优点

1、可富集分析低丰度蛋白;

2、探针制备简便,周期短;

3、获得特异性蛋白与下游蛋白质检测技术兼容。

DNA Pull-down的缺点

1、长链探针往往存在非特异结合现象;

2、反应条件要求无核酸酶;

3、体外实验,相对体内实验存在一定弊端。

客户下单及项目信息填写

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1、组织、细胞等样品类型及目的基因种属、ID号与序列等相关信息;

2、样本数量、检测方法(可选WB或MS);

3、尽可能丰富的相关资料、文献。

实验信息

实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户,并发送实验报告查看网址。实验结题后,实验报告、检测结果可在线查看或打印,并永久保留。

实验周期

致电详询

实验交付与标准

实验交付与标准 

1、所有实验的原始数据(包括实验过程、实验试剂与设备等);

2、详细实验报告及结果分析(可选Western blot或MS结果);

3、构建含目的基因的质粒、菌液,测序报告。

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