背景说明
重组腺病毒载体（Recombinant adenovirus vectors，rAdV）是以Ad为基础发展起来的工具病毒载体，它可通过受体介导的内吞作用进入细胞内，但Ad基因组不整合进入宿主细胞基因组中。rAdV作为一种常用的基因操作工具，已在心血管领域、肝脏、肌肉、肺、肿瘤及其他领域得到的广泛应用。
图 Ad衣壳结构示意图（Khare R,et al. 2011）
原理简介
Ad感染过程剧烈，适于短时间内进行基因高表达的实验，与其它病毒相比，rAdV插入片段较长，表达活性强。已知人体Ad有52种，分别命名为Ad1～Ad52，目前常用的rAdV是5型血清型Ad（Ad5），其基因组是36kb长的线性双链DNA。Ad5缺失了腺病毒的早期表达基因序列E1和E3，其中，E1是腺病毒复制所必须的，因此，E1缺失使Ad不能完成自身复制，只能依靠包装细胞提供的反式互补方式进行复制扩增，保证rAdV安全性；E3蛋白可对抗宿主的抗病毒防御系统，因此，E3区的缺失可减少宿主免疫反应。
图 rAdV包装和侵染过程
我司载体简介
我司采用最新的AdMax系统包装rAdV，通过Cre-loxp重组酶，使共转染到293细胞中的rAdV穿梭质粒和骨架质粒（Ad基因组质粒）在重组酶的作用下产生rAdV，获得高滴度病毒。
我司原始细胞腺病毒包装载体列表，可根据不同的需求，选择不同的载体，插入不同的位置
图 原始商品化腺病毒载体
服务流程
客户在线下单——订单/实验材料确认——构建腺病毒载体与目的载体——共转染293T细胞——P1代病毒收集——病毒扩增——病毒浓缩和纯化——重组腺病毒鉴定（包括病毒滴度、质粒残留、宿主DNA残留、BSA残留、支原体检测、衣原体检测、内毒素检测、细菌及真菌检测等）——可选后续感染目的细胞及相关实验
服务内容及说明
适用范围
现在腺病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA干扰、miRNA研究以及活体动物实验中。
客户下单及项目信息填写
在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录，请客户按照页面提示填写：细胞名称、诱导因子、检测方式等信息，细胞可选自行提供或我司提供。
实验信息
实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户，并发送实验报告查看网址。实验结题后，实验报告、检测结果可在线查看或打印，并永久保留。
实验周期
致电详询
实验交付内容
1、所有实验的原始数据（包括实验过程、实验试剂与设备等）；
2、重组载体的全序列信息和注释信息；
3、重组载体的酶切图谱；
4、重组载体测序结果；
5、引物序列；
6、病毒质控鉴定报告与结果分析（包含滴度鉴定、BCA检测、支原体检测等可选）；
7、1mL高滴度重组腺病毒载体（不低于1010PFU/mL）；
8、0.1mL阴性对照病毒（不低于1010PFU/mL）。
文献示例
体内注射rAdV实例
图 体内注射Ad-Sirt1后，与注射Ad-EGFP的对照相比，胰岛中Sirt1的表达显着增加（Tang MM, et al. 2011）。
我司腺病毒感染细胞效率实例
参考文献
Khare R, Chen CY, Weaver EA, et al. Advances and future challenges in adenoviral vector pharmacology and targeting. Curr Gene Ther. 2011;11(4):241-258.
Tang MM, Zhu QE, Fan WZ, et al. Intra-arterial targeted islet-specific expression of Sirt1 protects β cells from streptozotocin-induced apoptosis in mice. Mol Ther. 2011;19(1):60-66.
