背景说明
细胞划痕实验是一种操作简单，经济实惠的研究细胞迁移的体外试验方法，类似体外伤口愈合模型。是在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上，用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中央区域划线，去除中央部分的细胞，然后继续培养细胞至实验设定的时间，依据划痕边缘细胞逐渐进入空白区域使“划痕”愈合的能力，判断细胞生长迁移能力。因其类似体外伤口愈合过程，又名伤口愈合实验。
图 划痕实验示意图（Hulkower KI, Herber RL. 2011）
细胞迁移（Cell Migration）是指细胞在收到内源或外源迁移信号或感受到某些物质的浓度梯度后而产生的移动。移动过程中，细胞不断重复着向前方伸出突触/伪足，然后牵拉后方胞体的循环过程。细胞迁移是正常细胞的基本功能之一，是机体正常生长发育的生理过程，也是活细胞普遍存在的一种运动形式。
图 细胞迁移的4个步骤。
细胞侵袭（Cell Invasion）与细胞迁移密不可分，是指细胞在原位突破基底膜，然后内渗进入血管、淋巴管的过程，即入侵的细胞（如恶性肿瘤细胞）通过细胞外基质从一个区域侵入到另一个区域的能力，在侵袭到新区域之前，细胞外基质被细胞内的蛋白酶降解。细胞侵袭常发生于伤口修复、血管形成和炎症反应以及组织的异常浸润、肿瘤细胞转移等过程中。
实验原理
Transwell实验主要是研究细胞自身迁移/侵袭能力，主要材料是Transwell小室，外形为一个可放置在孔板里的小杯子，杯底为一张有通透性的滤膜，杯子其余部分材料与普通孔板一致。这层滤膜带有微孔，孔径大小从0.1μm到12.0μm不等，常用8.0μm或12.0μm。根据不同需要滤膜可用不同材料，一般常用聚碳酸酯膜（polycarbonate membrane）。
图 Transwell实验原理。
服务流程
客户在线下单——订单/实验材料确认——细胞培养与处理——划痕处理——洗细胞——加药处理（可选）——细胞培养、观察——结果分析——出具实验报告——结果交付
客户在线下单——订单/实验材料确认——细胞培养与处理——Transwell小室准备——制备细胞悬液——接种细胞——细胞固定——细胞染色——细胞计数（可选直接计数、脱色后酶标仪间接计数）——结果统计——出具实验报告——结果交付
服务内容及说明
细胞划痕适用范围
广泛用于观察药物、基因等外源因素对细胞迁移和修复的影响。
Transwell适用范围
应用不同孔径和经过不同处理的滤膜，可进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多方面研究。由于不同细胞的体积不同，选择时需考虑到细胞大小。这里主要谈几种常用实验：
1、共培养体系
细胞在滤膜孔径小于3.0μm的条件下不会通过，因此，若研究不涉及细胞运动能力、不需细胞穿过滤膜时，则应选择3.0μm以下孔径。将细胞A种于上室，细胞B种于下室，可研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞A的影响。
2、趋化性实验
上室细胞可穿过滤膜进入下室，计数进入下室的细胞量则可反映下室成分对上室细胞的趋化能力，详情如下：
（1）细胞B对细胞A的趋化作用：将细胞A种于上室，细胞B种于下室，研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞A的趋化作用；
（2）趋化因子对细胞的趋化作用：将细胞种于上室，下室加入某种趋化因子，研究该趋化因子对细胞的趋化作用。
3、肿瘤细胞迁移实验
上室种肿瘤细胞，下室加入FBS或某些特定的趋化因子，肿瘤细胞会向营养成分高的下室迁移，计数进入下室的细胞量可反映肿瘤细胞的迁移能力。
4、肿瘤细胞侵袭实验
与肿瘤细胞迁移实验类似，但与肿瘤细胞迁移实验不同的是，上室需铺上一层基质胶（常用人工重构基底膜材料Matrigel）以模仿体内细胞外基质（Extracellular matrix，ECM），细胞欲进入下室，先要分泌基质金属蛋白酶（MMPs）将基质胶降解，方可通过聚碳酸酯膜。计数进入下室的细胞量可反映肿瘤细胞的侵袭能力。
客户下单及项目信息填写
在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录，请客户按照页面提示填写项目名称、选择项目类型、填写个人信息及联系方式，提交项目所需要的具体信息，包括：
1、细胞类型与名称；
2、检测时间节点；
3、细胞处理方式及实验条件参数设置；
4、尽可能丰富的相关资料、文献。
实验信息
实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户，并发送实验报告查看网址。实验结题后，实验报告、检测结果可在线查看或打印，并永久保留。
实验周期
致电详询
实验交付内容
1、所有实验的原始数据（包括实验过程、实验试剂与设备等）；
2、各时间点的划痕图片（同一划痕提供5个不同时间点的显微视野）；
3、染色原始图片（同一小室提供5个不同显微视野）；
4、实验报告与结果分析（包括软件分析、结果统计分析等，可选直接计数或间接计数）。
细胞划痕优势特点
1、在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程；
2、非常适合研究细胞与胞外基质（ECM），细胞与细胞之间相互作用引起的细胞迁移；
3、与包括活细胞成像在内的显微镜系统兼容，可用于分析细胞间的相互作用；
4、研究细胞迁移的体外实验中最简单的方法。
文献示例
细胞划痕文献示例
图 细胞划痕实验检测细胞迁移（Bi et al., 2021）
Transwell文献示例
图 Transwell检测细胞迁移（上）与侵袭（下）能力（Liu Z, et al. 2018）
参考文献
Bi M, Zheng L, Chen L, et al. ln RNA LINC01234 promotes triple-negative breast cancer progression through regulating the miR-429/SYNJ1 axis. Am J Transl Res. 2021;13(10):11399-11412.
Hulkower KI, Herber RL. Cell migration and invasion assays as tools for drug discovery. Pharmaceutics. 2011;3(1):107-124
Liu Z, Wang Y, Dou C, et al. Hypoxia-induced up-regulation of VASP promotes invasiveness and metastasis of hepatocellular carcinoma. Theranostics. 2018;8(17):4649-4663.
