背景说明

当被荧光探针或染料标记的细胞悬液进入流式细胞仪的液流系统时会形成单细胞排列的微细流束，当细胞通过仪器的激光束照射时，细胞上的荧光标记会被相应的激光束激活发出荧光并通过敏感的光电倍增管进行信号检测。根据检测的散射光可以分析细胞大小及颗粒状态信息；根据荧光信号强度可以分析结合在细胞上的抗体信息以及细胞表面相应分子的表达情况。

在需要进行细胞分选时，计算机收集到的信号可以在流式细胞仪分离装置中产生电荷并以特定准确的时间通过FACS的吸管孔，在与吸管孔的液体流相相遇时将液体流打碎成只含一个细胞的微滴。含有电荷的微滴就会从主液体流中偏移，穿过一双极板。带正电荷的微滴被吸引至阴极，而带负电荷的被吸引至阳极。以这种方式，特定的细胞亚群由于标记着不同的荧光抗体而带有不同的电荷，从而将目的细胞从混合的细胞群中分拣出来。

图 流式细胞仪的原理（Zand et al., 2021）。

技术优势

1、高通量检测能力

与传统显微镜手动技术相比，流式细胞仪能够实现每秒数千至数万个细胞分析，显著缩短实验周期。适用于大规模样本筛查（如血液病分型、肿瘤免疫监测），满足临床快速诊断需求。

2、多参数同步检测

能够在单个细胞内同时进行多参数（分型、DNA含量、细胞功能等）检测，实现多指标同步检测需求。

3、高灵敏度与准确性

由于将细胞颗粒度和大小等参数转换为荧光信号，能够实现低丰度分子定量分析；并且借助荧光补偿和全光谱，能够解决多色重叠串扰问题，提高数据准确性。

4、实时高精度细胞分选

结合荧光探针以及分选装置，能够实时检测细胞内信号转导过程，并精准分选目标细胞群体，纯度可达95%以上。

5、定量客观性与可重复性

使用荧光微球作为内参，能够实现绝对数量计数，避免主观误差，并可通过自带软件实现结果比对和分析，具有高可重复性。

应用场景

1、细胞功能检测

使用特定荧光探针对细胞进行标记后，利用流式细胞仪能够准确检测细胞增殖（BrdU标记）、凋亡（Annexin V/PI标记）、细胞周期（PI标记）、活性氧ROS水平（DHE标记）以及线粒体膜电位（JC-1标记）等细胞功能。

2、免疫表型分析

借助荧光染料偶联抗体，流式细胞仪能够同时分析免疫细胞群体的多个参数如免疫细胞分型（CD3/CD4/CD8等）、细胞功能标记（CD69和CD25）、趋化因子受体以及细胞内标志物（TNF-α、IL-2）等。目前流式细胞仪最高能实现多达28种颜色的实验。

3、细胞分选

通过将不同细胞进行差异荧光标记，可以使用流式细胞仪进行细胞精准分选，并且分选后的细胞仍然可以进行升华分析或培养，因此为原代细胞分离、单细胞测序等实验提供巨大帮助。

4、细胞DNA含量检测

DNA检测是流式细胞学早期成功应用之一，流式细胞学结合高度精确的DNA荧光染料（如PI）能够准确测量DNA含量变化，因此在细胞生物学、癌症研究、药物开发和临床检测中得到广泛应用。

5、细胞功能和信号转导研究

通过检测细胞表面和内部各种蛋白如细胞因子、细胞膜受体等的表达水平，帮助研究细胞的功能和状态。通过使用钙离子或pH荧光染料，能够实时检测细胞内钙离子浓度和pH变化，分析细胞信号转导过程。

客户下单及项目信息填写

在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录，请客户按照页面提示填写：细胞名称、培养方式、检测要求等信息，细胞及检测试剂可选自行提供或我司提供。

实验信息

实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户，并发送实验报告查看网址。实验结题后，实验报告、检测结果可在线查看或打印，并永久保留。

实验周期

致电详询

交付标准

1、结题报告：包含详细的实验设备和试剂信息、实验流程、实验主要结果展示等；

2、原始数据：所有原始数据图表文件、实验记录文件等信息；

3、质控标准：标准质控流程，包含流式细胞仪操作质控等信息。

文献示例

图 流式细胞仪进行细胞分选示例（Verschoor et al., 2015）。

参考文献

Verschoor CP, Lelic A, Bramson JL, Bowdish DM. An Introduction to Automated Flow Cytometry Gating Tools and Their Implementation. Front Immunol. 2015;6:380.

Zand E, Froehling A, Schoenher C, et al. Potential of Flow Cytometric Approaches for Rapid Microbial Detection and Characterization in the Food Industry-A Review. Foods. 2021;10(12):3112.