背景说明
细胞增殖是生活细胞的重要生理功能之一,是生物体的重要生命特征,是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。检测细胞增殖的能力是评价细胞、代谢、生理、病理状况、细胞活性、基因毒性等的重要指标之一。细胞增殖与多种因素有关,比如细胞代谢活性、与细胞增殖相关的蛋白表达、ATP的浓度等等。
细胞增殖检测,也是细胞活性/毒性检测,是细胞功能检测的一部分,目前已有多种检测细胞增殖的方法。我司常用的细胞增殖检测方法有以下几种:
表 MTT法、CCK-8、XTT法、CTG对比
比较项 |
MTT |
CCK-8 |
XTT |
CTG |
产品形状 |
粉末 |
1瓶溶液 |
2瓶溶液 |
溶液/冻干粉 |
试剂稳定性 |
一般 |
良好 |
水溶液不稳定 |
良好 |
使用方法 |
配成溶液后使用 |
即开即用 |
现用现配 |
解冻 |
甲瓒溶解性 |
DMSO |
水溶性 |
水溶性 |
|
细胞用量 |
常规 |
常规 |
少 |
少 |
细胞毒性 |
高 |
低 |
低 |
裂解细细胞 |
检测时间 |
较长 |
较短 |
较短 |
最短 |
检测波长 |
570nm |
450nm |
450nm |
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便捷程度 |
一般 |
较便捷 |
较便捷 |
非常便捷 |
检测灵敏度 |
高 |
较高 |
较高 |
非常高 |
批量样本检测 |
可以 |
非常适合 |
非常适合 |
非常适合 |
EdU的优点
1、更简单:无需抗原抗体反应,基于小分子化学反应的检测方法简单高效,反应仅需要几分钟;
2、更灵敏:无需抗体,检测染料仅BrdU抗体的1/500,很容易扩散,即便是单个增殖细胞也能准确检测;
3、更快速:无需过夜,省却了抗原抗体反应的复杂繁琐步骤,完成整个检测周期仅需5h;
4、更准确:无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免变性带来的样品损伤,确保细胞核边缘清晰完整;
5、更兼容:对样品几乎无损伤,更容易与多种抗体或荧光蛋白同时标记,能够同时检测细胞其他性状特征;
6、多种染料可选,适用于各种动物细胞检测,对植物细胞亦适用。
平板克隆的优点
1、克隆形成结果肉眼可见,便于观察;
2、结果精确、可靠。
平板克隆的缺点
1、操作繁琐;
2、对部分克隆形成率较低的细胞不适用。由于细胞生物学性状不同,细胞克隆形成率差别较大,原代细胞克隆形成率较弱,传代细胞系较强;二倍体细胞克隆形成率较弱,转化细胞系较强;正常细胞克隆形成率较弱,肿瘤细胞较强;
3、克隆形成率与接种密度还有一定关系,对实验人员要求较高。
服务内容及说明
适用范围
MTT、XTT、CCK-8、CTG广泛适用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。
EdU广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究,尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的细胞增殖筛选实验。
克隆形成实验(平板克隆、软琼脂克隆)常用于抗肿瘤药物敏感性测定、基因治疗、肿瘤放射生物学等方面的研究,不仅可评价不同杀伤因素(药物、基因等)对细胞增殖能力或群体依赖性的敏感性;还可评价细胞在体内成瘤性,这是由于癌细胞不一定都可在体内成瘤,但体外克隆能力越强,体内成瘤性越强,算是一种模拟体内成瘤的体外实验。
客户下单及项目信息填写
在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录,请客户按照页面提示填写项目名称、选择项目类型、填写个人信息及联系方式,提交项目所需要的具体信息,包括:
1、细胞类型与名称;
2、检测时间节点;
3、尽可能丰富的相关资料、文献。
实验信息
实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户,并发送实验报告查看网址。实验结题后,实验报告、检测结果可在线查看或打印,并永久保留。
实验周期
致电详询
实验交付内容
1、所有实验的原始数据(包括实验过程、实验试剂与设备等);
2、检测报告与结果分析;
3、具体实验报告。
文献示例