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下单说明
伯远生物是国家级专精特新小巨人企业,国家级重点实验室,牵头多项省部级重大专项,公司科研技术人员500+(硕博占比40%以上),作为功能基因研究综合性平台, 15年技术沉淀,每年完成功能基因研究数量50000+,长期服务课题组10000+(含协和、同济、华西、湘雅、中山、军事医学院等顶尖医学研究机构) ,各类仪器设备投资超1个亿
伯远生物专注于小分子互作蛋白筛选与验证,提供多技术路线支持与一站式解决方案。
平台覆盖三种主流策略:直接法、光交联法及邻近标记交联法,可满足从已知靶点验证到未知靶标筛选的多样化需求。其中,光交联与邻近标记技术通过共价捕获机制有效降低假阳性,提高结果可靠性。
公司具备国家级“专精特新小巨人”资质,年检测样本量超过5万例,拥有成熟稳定的技术体系与丰富项目经验。
依托自有高分辨率质谱平台,可实现微量互作蛋白的高灵敏度鉴定,并已助力客户在 Cell Discovery、Nature Methods、Signal Transduction and Targeted Therapy等高水平期刊发表成果。
在实验体系方面,伯远生物基于生物素标记的小分子Pull-down技术,可高效捕获目标蛋白,并进一步联用 SPR、ITC、MST等分子互作技术进行多维验证,构建从筛选到机制确认的完整证据链。
同时提供从重组蛋白制备、Pull-down实验到质谱鉴定的全流程服务,并结合高灵敏度检测手段(如银染)提升低丰度蛋白检出能力。
对于样本送检,伯远生物提供本地化服务支持与快速响应;在实验方案选择上,简单已知靶点验证可采用经典直接法方案,而针对高水平文章发表或未知靶点筛选需求,则推荐光交联或邻近标记策略,以获得更高可信度和发表竞争力的数据。
此外,伯远生物还提供配套小分子Pull-down试剂盒,支持客户自主开展实验,并可结合自身质谱平台实现WB+MS双重检测,灵活满足不同科研阶段需求。
我司案例

图2 小分子Pull-down验证ROCK2蛋白与小分子Cel互作。
背景说明
蛋白质与小分子之间的相互作用在生物学研究和药物开发中至关重要,而常用的研究方法包括SPR、BLI和ITC等技术,但基本都是纯体外实验、通量低、仪器昂贵、操作复杂。化学蛋白质组学技术,是利用化学探针,结合蛋白质组学,以小分子靶点发现、创新药物先导化合物筛选。而小分子Pull-Down实验是通过将小分子化合物标记(常用生物素标记,或固定在beads上),然后与细胞裂解液或蛋白样品共孵育,以捕获与小分子结合的靶蛋白,最后用WB(点对点)或者质谱高通量检测。
小分子Pull-Down的实验原理:生物素标记的小分子与蛋白裂解液充分孵育(有些项目中会分离特定的细胞器蛋白),使用溶剂(如DMSO)组作为阴性对照(部分文献会同时会使用非标记的等量的小分子化合物或游离生物素作为平行对照组)。然后链霉亲和素标记的磁珠特异性的捕获生物素分子,与小分子结合的蛋白会被同时亲和纯化洗脱,通过SDS-PAGE(或使用灵敏度更高的银染)检测不同组别的蛋白差异情况,最后质谱进行蛋白组学鉴定(或WB点对点验证)。

图1 基于生物素的小分子Pull-down实验原理(Hsu et al., 2022)。
服务流程
客户在线下单——小分子生物素标记——细胞培养——细胞裂解及小分子(药物)孵育——链霉亲和素纯化——WB检测或质谱分析。
服务流程
客户在线下单——小分子生物素标记——细胞培养——细胞裂解及小分子(药物)孵育——链霉亲和素纯化——WB检测或质谱分析。
服务内容及说明
适用范围
1、直接靶点鉴定;
2、靶点验证与互作确认;
3、相互作用组研究。
客户下单及项目信息填写
在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录,请客户按照页面提示填写:
1、项目名称、选择项目类型、填写个人信息及联系方式进行预提交;
2、提交项目所需要的具体信息:细胞样本、目标蛋白及对应的一抗等。
实验信息
实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户,并发送实验报告查看网址。实验结题后,实验报告,检测结果可在线查看或打印,并永久保留。
实验周期
致电详询。
实验交付内容
1、蛋白的WB条带图;
2、完整的实验数据及实验报告。
参考文献
Hsu C C, Xu Z G, Lei J, et al. Identification of myo-inositol-binding proteins by using the biotin pull-down strategy in cultured cells[J]. STAR protocols, 2022, 3(2): 101385.