背景说明

细胞膜流动性是细胞膜执行多种生命活动的前提。它确保了膜蛋白（如受体、通道蛋白） 能正常移动和构象变化，从而保障物质运输、细胞信号转导、能量转换等关键过程的顺利进行。膜流动性是一个动态指标，能灵敏地反映细胞的健康状况，面对氧化应激、温度变化等环境压力时，细胞会通过调整膜脂成分来维持流动性稳定，检测其变化可评估应激程度。

在多种细胞膜流动性检测方法中，荧光漂白恢复技术（FRAP）凭借其独特优势，成为该领域的“金标准”。Fluorescence Recovery After Photobleaching(FRAP)即荧光漂白恢复技术，其检测细胞膜流动性的主要原理如下：

①首先使用特定荧光染料标记细胞膜上的脂质或蛋白质;

②随后用高强度激光照射细胞某一区域，使该区域荧光分子发生不可逆的漂白;

③然后监测漂白区域荧光强度随时间恢复的过程;

④最后通过分析荧光恢复曲线，计算出细胞膜的扩散系数和流动性参数;整个过程可在数分钟内完成，提供定量化的膜流动性数据。

图1 FRAP检测细胞膜流动性的原理（Sarkar et al., 2020）。

服务内容及说明

技术优势

1.活细胞检测，保持生理状态

与传统生化方法不同，FRAP技术最大优势在于能够在活细胞中进行实时检测，不需要破碎细胞或提取膜组分，完全保持了细胞膜的天然状态和生理环境。

2.高时空分辨率

现代共聚焦显微镜与FRAP技术结合，可实现对特定细胞区域的精准检测，分辨率可达微米级别。研究者可以选择细胞膜的特定区域（如脂筏区域）进行检测，获得更为精确的局部流动性数据。

3.定量化分析

FRAP不仅提供定性结果，还能通过数学模型计算出扩散系数（D值）和可动分数（M值）等定量参数。

4.多功能性

FRAP技术不仅可用于检测脂质流动性，还可研究膜蛋白的运动特性、分子间相互作用等，应用范围极为广泛。

客户下单及项目信息填写

在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录，请客户按照页面提示填写：

1、项目名称、选择项目类型、填写个人信息及联系方式进行预提交；

2、提交项目所需要的具体信息：细胞样本、目标蛋白及对应的一抗等。

实验信息

实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户，并发送实验报告查看网址。实验结题后，实验报告，检测结果可在线查看或打印，并永久保留。

实验周期

致电详询 

实验交付内容

1、共聚焦显微镜拍照的照片；

2、完整的实验数据及实验报告。

案例展示

我司以BODIPYFLC5-HPC(亲脂性绿色荧光染料)染色的牙周膜干细胞为研究对象，通过FRAP技术检测不同浓度LPS对细胞膜流动性的影响。

分组:A为对照组，B为低浓度LPS，C为高浓度LPS。

结果:细胞膜在激光漂白后，A组荧光恢复率达57.7%，B组荧光恢复率达32.6%，C组荧光恢复率达19.3%。

结论:表明不同浓度LPS刺激可显著降低牙周膜干细胞的细胞膜流动性，且呈现浓度依赖性，浓度越高抑制作用越强。

图2 FRAP检测LPS处理牙周膜干细胞后的细胞膜流动性

参考文献

Sarkar P,Chattopadhyay A. Exploring membrane lipid and protein diffusion by FRAP[M]//Analysis of Membrane Lipids.New York, NY: Springer US,2020:119-141.