背景说明

 cDNA末端快速扩增技术（Rapid amplification of cDNA ends，RACE）是一种根据部分cDNA序列基于RCR方法获取完整cDNA全长的技术。与常规PCR相比，RACE仅使用一种特异性PCR引物和第二种非特异性引物，根据需要扩增的区域在cDNA的3’端或5’端来选择第二种引物结合polyA尾巴（3’RACE）还是结合在转录本上（5’RACE）。cDNA末端快速扩增技术（Rapid amplification of cDNA ends，RACE）是一种根据部分cDNA序列基于RCR方法获取完整cDNA全长的技术。与常规PCR相比，RACE仅使用一种特异性PCR引物和第二种非特异性引物，根据需要扩增的区域在cDNA的3’端或5’端来选择第二种引物结合polyA尾巴（3’RACE）还是结合在转录本上（5’RACE）。

图 3' RACE原理

利用mRNA 3’末端的polyA尾巴作为一个引物结合位点，以Oligo（dT）作为锁定引物反转录合成标准第一链cDNA，然后用一个基因特异引物作为上游引物，用一个含有部分接头序列的通用引物作为下游引物，以cDNA第一链为模板，进行PCR循环，把3’末端的cDNA片段扩增出来。

图 5' RACE原理

利用一条基因特异性反转录引物，在反转录酶的作用下合成cDNA第一链，将RNA-DNA杂合链中的RNA降解纯化后，利用末端转移酶在cDNA链的3’端加入polyC尾巴，然后利用锚定引物和一条基因特异性引物扩增。

服务内容及说明

适用场景

获得未知基因完整的3’端或5’端cDNA序列，找到完整的开放阅读框（ORF）。

客户下单及项目信息填写

在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录，请客户按照页面提示填写：目的基因信息、载体构建详情，后续转染的细胞可选自行提供或我司提供。

实验信息

实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户，并发送实验报告查看网址。实验结题后，实验报告、检测结果可在线查看或打印，并永久保留。

实验周期

致电详询

实验交付内容

1、所有实验的原始数据（包括实验过程、实验试剂与设备等）；

2、重组过表达载体：一份质粒、一份大肠杆菌菌液（25%甘油菌）；

3、重组载体的全序列信息和注释信息；

4、重组载体的酶切图谱；

5、重组载体的测序结果；

6、后续所有实验的相关结果。