背景说明
针对目标区域体外制备脱硫生物素标记的特异性DNA探针,使其与待测蛋白液孵育,可与偶联在磁珠上的链霉亲和素结合,形成“生物素化DNA-蛋白质”复合物。生物素与链霉亲和素间的作用是目前已知强度最高的非共价作用,采用链霉亲和素磁珠将靶DNA及其结合蛋白从待测蛋白液中分离出来,洗涤后,将非特异性结合蛋白去除,最后,经洗脱液洗脱,得到目的DNA探针-蛋白质复合物,通过western blot检测洗脱液中是否有待测蛋白;通过LC-MS/MS技术检测靶DNA的潜在结合蛋白并鉴定蛋白质类型。
图 DNA Pull-down流程图
服务流程
客户在线下单——订单/实验材料确认——样品处理——探针标记——蛋白与探针共孵育——Western blot或LC-MS/MS检测——结果交付
服务内容及说明
适用范围
1、验证已知DNA与蛋白的相互作用;
2、筛选与已知DNA相互作用的未知蛋白。
DNA Pull-down的优点
1、可富集分析低丰度蛋白;
2、探针制备简便,周期短;
3、获得特异性蛋白与下游蛋白质检测技术兼容。
DNA Pull-down的缺点
1、长链探针往往存在非特异结合现象;
2、反应条件要求无核酸酶;
3、体外实验,相对体内实验存在一定弊端。
客户下单及项目信息填写
在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录,请客户按照页面提示填写项目名称、选择项目类型、填写个人信息及联系方式,提交项目所需要的具体信息,包括:
1、组织、细胞等样品类型及目的基因种属、ID号与序列等相关信息;
2、样本数量、检测方法(可选WB或MS);
3、尽可能丰富的相关资料、文献。
实验信息
实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户,并发送实验报告查看网址。实验结题后,实验报告、检测结果可在线查看或打印,并永久保留。
实验周期
致电详询
实验交付与标准
1、所有实验的原始数据(包括实验过程、实验试剂与设备等);
2、详细实验报告及结果分析(可选Western blot或MS结果);
3、构建含目的基因的质粒、菌液,测序报告。