背景说明

随着昆虫杆状病毒表达载体系统（BEVS）的广泛应用，昆虫细胞的体外培养也越来越受到重视。从1915年，昆虫细胞培养起始，经过一百多年的发展，已在细胞、分子、医学等方向广泛应用。目前，常用于培养的昆虫细胞以草地贪夜蛾细胞株Sf9和Sf21，以及粉纹夜蛾细胞株Tn5B1-4（商品名High Five）为主。

昆虫细胞传代/冻存/复苏的一般步骤与哺乳动物细胞相同，但有些关键点又有所不同。

（1）昆虫细胞应于28°C、非湿化环境中培养。培养昆虫细胞时建议不要进行CO2交换，所以培养瓶选择密闭盖；

（2）使用昆虫细胞专用的培养基；

（3）贴壁昆虫细胞：细胞密度低于汇合状态的20%时，细胞生长会受到抑制。健康状态最好的细胞是对数期收获的细胞，故昆虫细胞应在对数期传代。但是，如果培养的是强贴壁性昆虫细胞，则应在细胞达到汇合状态或者刚刚开始从培养瓶底部脱离时进行传代，因为此时细胞容易脱离；

（4）某些昆虫细胞系可能需要一定的过程来适应悬浮培养。进行细胞悬浮培养时无需更换培养基。定期传代时需要吸出细胞悬液，然后加入适量培养基，将细胞稀释到适当的密度。添加新鲜培养基后可使细胞营养素达到完全补充；

（5）贴壁昆虫细胞在无血清培养条件下，昆虫细胞与基质贴附极为牢固，需要花费较大力气才能使其脱落。要使细胞脱落，最佳的方法是盖紧瓶盖，并以瓶盖朝上的方向抓住培养瓶，在台面上以中等力量敲击瓶底2~3次，这样将会有足够的细胞解离下来用于传代。

注意：千万不要剧烈摇晃培养瓶，昆虫细胞对吹打、气泡等机械损伤非常敏感，若吹打力度过大、气泡过多将严重影响细胞生长状态，甚至造成细胞损伤。

服务内容及说明

客户下单及项目信息填写

在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录，请客户按照页面提示填写：细胞名称、培养方式等信息，细胞可选自行提供或我司提供。

实验信息

实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户，并发送实验报告查看网址。实验结题后，实验报告、检测结果可在线查看或打印，并永久保留。

实验周期

致电详询

实验交付内容

1、冻存细胞2管，总量2×106；

2、T25克氏瓶（细胞密度70%-80%时装满新鲜培养基，保留少量空气拧紧瓶盖）；

3、细胞鉴定报告（包括：细胞状态图、支原体检测结果等）。

文献示例

我司Sf9细胞培养实例图。