背景说明

 1948年，FRET技术被首次提出，是采用物理方法检测分子间的相互作用的方法，是一种检测蛋白质-蛋白质相互作用的技术，它的最大优势是能从“时间、空间、动态、连续”对活细胞中蛋白质之间的相关作用进行检测；也可以与其他技术结合，既能研究两个蛋白之间的相互作用，还可研究3个或者更多蛋白之间的相互作用，甚至是对信号网络的研究，这对于生命及医药等领域的研究来说是非常有力的技术工具。

 FRET的产生必须具备两个条件，一是供体的发射光谱和受体的激发（或吸收）光谱必须有部分重叠；另外供体和受体之间的距离必须足够小（一般小于10nm）。

  FRET的检测原理即将两种荧光蛋白分别与两种目的蛋白融合表达，形成荧光供体蛋白与荧光受体蛋白，当两个融合蛋白之间的距离在5-10nm的范围内，则供体发出的荧光可被受体吸收，并激发受体发出荧光，此时通过测量供体荧光强度的损失量来确定这两个蛋白是否相互作用。两个蛋白距离越近，供体所发出的荧光被受体接收的量就越多，检测器所接收到的荧光就越少。

图 FRET的原理机制（Choi et al., 2021）。

服务内容及说明

适用范围

FRET已成为检测活体中生物大分子纳米级距离和纳米级距离变化的有力工具，在生物大分子相互作用分析、细胞生理研究、免疫分析等方面有着广泛的应用。不仅可验证蛋白相互作用，还可表征这种相互作用距离的动态变化。常用于解决蛋白分子共定位、蛋白分子聚合体、转录机制、转换途径、分子运动、蛋白折叠等生物学问题。

客户下单及项目信息填写

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实验信息

实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户，并发送实验报告查看网址。实验结题后，实验报告、检测结果可在线查看或打印，并永久保留。

实验周期

致电详询

实验交付内容

1、所有实验的原始数据（包括实验过程、实验试剂与设备等）；

2、重组融合表达载体：一份质粒、一份大肠杆菌菌液（25%甘油菌）；

3、重组载体的全序列信息和注释信息；

4、重组载体的酶切图谱；

5、重组载体的测序结果；

6、FRET相关结果分析报告。

案例展示

图 FRET荧光信号的定量分析（Liao et al., 2015）。

参考文献

Choi JH, Ha T, Shin M, Lee SN, Choi JW. Nanomaterial-Based Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET) and Metal-Enhanced Fluorescence (MEF) to Detect Nucleic Acid in Cancer Diagnosis. Biomedicines. 2021;9(8):928.

Liao JY, Song Y, Liu Y. A new trend to determine biochemical parameters by quantitative FRET assays. Acta Pharmacol Sin. 2015;36(12):1408-1415.