背景说明
Label-free是通过比较质谱分析次数或质谱峰强度,分析不同来源样品蛋白的数量变化,认为肽段在质谱中被捕获检测的频率与其在混合物中的丰度成正相关, 因此蛋白质被质谱检测的计数反映了蛋白质的丰度,通过适当的数学公式可以将质谱检测计数与蛋白质的量联系起来,从而对蛋白质进行定量。按照其原理主要分为两种,第一种spectrum counts类的非标记方法,发展比较早,已经形成多种定量算法,但是主要的原理都是以MS2的鉴定结果为定量基础,各种方法的差别在于后期算法在大规模数据上的修正。第二种非标记定量的原理是以MS1为基础,计算每个肽段的信号强度在LC-MS上的积分。
目前,已经有一系列配套的非标记定量分析软件,其中包括的GE公司开发的DeCyder MSTM商业化软件,领先的蛋白质组学定性定量算法MaxQuant。运用这些软件,对液相色谱串联质谱数据非标记定量分析是将质谱数据由谱峰形式转化为直观的类似双向凝胶的图谱,谱图上每一个点代表一个肽段,而不是蛋白质;再比较的不同样本上相应肽段的强度,从而对肽段对应的蛋白质进行相对定量。实践证明其具有很好的定量准确性和可信性,现在已经逐渐成为蛋白质组学领域内的标准解决方案。
图 Label-free实验流程图。
服务流程
客户在线下单——订单/实验材料确认——蛋白提取——蛋白酶解——高效液相HPLC预分离——MS质谱分离——原始数据搜库分析——生物信息学分析——交付结果
服务内容及说明
适用范围
1、机理和调控机制研究;
2、动态过程中机制研究;
3、疾病标志物的筛选;
4、用药及预后标志物筛选;
5、不同组织、细胞、体液或生物体样品不同状态下的差异蛋白比较。
实验周期
致电详询
客户下单及项目信息填写
在我司官网http://plant.biorun.com/进行注册或登录,请客户按照页面提示填写项目名称、选择项目类型、填写个人信息及联系方式,提交项目所需要的具体信息,包括:
1、样品来源、含量、状态及其他基本信息;
2、尽可能丰富的相关资料、文献。
实验信息
实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户,并发送实验报告查看网址。实验结题后,实验报告、检测结果可在线查看或打印,并永久保留。
实验交付内容
1、所有实验的原始数据(包括实验过程、实验试剂与设备等);
2、表观组学基础数据分析与差异数据分析(生物信息学分析);
3、生物信息学分析内容包括:
(1)Label-free定量:包括定量信息统计、蛋白质定量结果及肽段定量统计;
(2)功能注释:包括GO注释、COG注释和Pathway代谢通路注释。