背景说明
我司具有丰富的CRISPR/Cas9基因编辑项目经验,致力于为广大客户提供定制的基因编辑细胞系构建服务。CRISPR/Cas9相比于传统的锌指核酸酶(ZFN)和转录激活因子样效应核酸酶(TALEN)提高了基因编辑的准确性和特异性,它的效率是传统ZFN和TALEN系统的三到四倍。而且,只需导入几个不同的引导RNA(sgRNA),即可编辑多个基因。
我司可做细胞系及服务项目
服务流程
客户在线下单——订单/实验材料确认——靶点设计——基因编辑载体构建——病毒包装(可选,建议选用慢病毒包装)——瞬时转染目标细胞——抗生素筛选(可选嘌呤霉素、G418等)并测序——培养皿筛选单克隆或多克隆细胞并测序——96孔板进一步筛选单克隆或多克隆细胞并测序——获取单克隆或多克隆细胞——可选后续实验(包括:体内注射、功能研究等等)
服务内容及说明
适用范围
构建稳定敲除细胞系
客户下单及项目信息填写
在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录,请客户按照页面提示填写项目名称、选择项目类型、填写个人信息及联系方式,提交项目所需要的具体信息,包括:
1、 细胞类型;
2、 靶向基因序列信息;
3、 尽可能丰富的相关资料、文献。
实验信息
实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户,并发送实验报告查看网址。实验结题后,实验报告、检测结果可在线查看或打印,并永久保留。
实验周期
致电详询
实验交付内容
1、所有实验的原始数据(包括实验过程、实验试剂与设备等);
2、鉴定报告与结果分析(基因编辑细胞系生物信息学解读结果、测序结果等);
3、基因编辑细胞系/株一份。
案例展示
敲除293T细胞的ICAM5基因
(1)将基因编辑载体转入细胞系后,经抗生素筛选,在靶点处有套峰,表明已有细胞敲除成功。
图 抗生素筛选敲除Icam5基因的293T细胞测序图
(2)用培养皿进行初筛,基本为双峰,保证后续挑的单克隆均已敲除。
图 培养皿初筛敲除ICAM5基因的293T细胞单克隆测序图
(3)将(2)筛岀的细胞再用96孔板筛单克隆细胞,保证得到的细胞为敲除了目的基因的单克隆细胞。
图 96孔板筛敲除ICAM5基因的293T细胞单克隆测序图