背景说明
根据目标基因sgRNA的位置,设计特异性的检测引物,接着对阳性细胞株进行DNA提取、PCR扩增和一代测序;最后对获取PCR产物的峰值图进行生物信息学解读,鉴定岀相应的突变形式。特异性引物设计如下:
图 基因编辑检测原理图
服务流程
客户在线下单——订单(靶点及基因组)/实验材料确认——引物设计——DNA提取——PCR扩增——测序鉴定——生物信息学解读——目标基因敲除细胞株系鉴定——上传检测结果——打印实验报告
服务内容及说明
实验目的
1、减轻客户繁琐的鉴定工作,将时间用于更重要的科研工作;
2、鉴定出转基因敲除苗,并对敲除苗的具体突变形式进行生物信息学解读。
我司优势及特点
1、贴近成本的定价
2、详细的鉴定报告
3、快速的实验周期
客户下单及项目信息填写
在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录,请客户按照页面提示填写:
1、项目名称、选择项目类型、填写个人信息及联系方式进行预提交;
2、提交项目所需要的具体信息,包括:物种、敲除的目标基因序列、靶标、样品总数及明细、检测要求。
实验信息
实验过程中客户可以随时登入管理系统査看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户,并发送实验报告査看网址。实验结题后,实验报告、检测结果可在线查看或打印,并永久保留。
实验周期
致电详询
实验交付与标准
1、PCR测序ABI文件;
2、基因敲除苗生物信息学解读结果。
案例展示
图 293T细胞基因敲除测序图
注意事项
1、组织速冻时间:组织离体后,胞内核酸便开始降解,尤其是RNA,故采集时,目的组织离体后,需立即速冻,建议5min内完成,越快越好。
2、组织送样量:送样量过少或过多均不利于提取实验,下限为建议量的一半,上限为建议量的3倍。
3、组织保存管的选择:所有组织样品务必使用离心管或螺纹管保存,切勿直接装入密封袋保存(低温冻脆易破裂,导致样品泄露,交叉污染)。
4、组织样品保存方法选择:首选液氮速冻;没有液氮条件的,可直接放入-80℃冰箱冻存。
5、冻融组织:组织冻存后,一旦冻融,RNA降解概率大于80%,几乎不可能提取成功,此类组织不建议送样。送样前确保组织未发生过冻融情况。
6、对于同一个组织样品需要同时提取DNA和RNA的,请务必分成两管分批次送样。