背景说明
本公司点突变技术服务使用我司专利MultiMutTM技术进行实验,与常规的突变每次只能突变一个位点不同,MultiMuTM可以一次性对DNA上多个指定位点进行碱基的增加、删除或突变。该技术也可以对多个位点同时进行随机突变,以便研究多个关键位点随机组合后的蛋白功能变化,可以快速的建立多个位点随机突变的突变体库,为体外蛋白进化的研究提供了高效解决方案。
图 我司点突变MultiMutTM技术原理
服务流程
客户在线下单——订单/实验材料确认——CloneCAD实验设计——突变实验
服务内容及说明
适用范围
1、消除DNA序列上的特别位点,如酶切位点、甲基化位点等;
2、将密码子进行同义突变或错义突变,研究密码子改变对蛋白翻译效率的影响;
3、研究氨基酸序列改变后对蛋白性能的影响,如研究蛋白磷酸化位点;
4、改变启动子核心元件的序列,研究其对基因转录的影响;
5、研究某些酶的酶学位点等。
实验周期
致电详询
实验交付内容
1、重组载体的全序列信息和注释信息;
2、重组载体的酶切图谱;
3、重组载体的测序结果;
4、重组载体:一份质粒、一份大肠杆菌菌液(25%甘油菌)。
优势特点
1、采用我司已被授权的国际PCT专利技术(专利号:US 10,144,936 B2)来进行载体的设计及突变;
2、可以一次性对DNA上多个位点进行碱基的增加、删除或突变;
3、可以多个位点同时进行随机突变;
4、可以与我司基因编辑服务、检测服务、互作类服务等衔接,整个实验可以畅通且快速地完成。
案例展示
图 对1.6kb的gus基因同时进行进行6种类型的突变,a位点为碱基缺失、b位点为碱基缺失和替换、c位点为碱基插入、d位点为多碱基缺失、e位点为多碱基替换、f碱基为多碱基插入,实验结果显示一次性全部突变成功。突变后的片段克隆至载体后转化大肠杆菌,进行菌液PCR鉴定,结果显示约75%的为菌斑预期重组子,随机取6个克隆进行测序,结果显示每个克隆的6个点全部实现了正确突变,突变成功率100%。