背景说明

稳转细胞系是指通过基因工程手段，将外源基因或RNA干扰序列整合到宿主细胞的染色体中，从而实现目标基因或蛋白的长期稳定表达或干扰的细胞系。其构建原理是将外源DNA克隆到具有抗性标志的载体上，通过病毒感染等方式将载体导入宿主细胞，并整合到染色体中，最终通过抗性标志筛选出能够稳定遗传和表达目标基因的细胞。

目前常见的稳转细胞系构建是通过慢病毒感染来实现的。慢病毒（Lentivirus）是一种逆转录病毒，能够将外源基因整合到宿主细胞的基因组中，从而实现长期稳定的基因表达。单克隆稳转细胞系构建通过慢病毒感染来完成。首先，选择合适的宿主细胞和载体，将目标基因插入载体，慢病毒包装载体；然后通过慢病毒感染细胞，并用抗生素筛选出稳定整合外源基因的细胞；接着，利用有限稀释法或单细胞分选技术将细胞稀释至单细胞水平进行培养；最后，经过多代培养和验证，筛选出稳定表达目标基因的单克隆细胞系。

图 使用慢病毒生成单克隆稳转细胞系的示意图

服务内容及说明

适用范围

单克隆稳转细胞系应用场景广泛，包括基因功能研究、药物筛选、重组蛋白与抗体生产、疾病模型构建、细胞治疗及疫苗研发等。

客户下单及项目信息填写

在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录，请客户按照页面提示填写：细胞名称、培养方式、转染要求、载体信息、抗性筛选等信息，细胞及载体可选自行提供或我司提供。

实验信息

实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户，并发送实验报告查看网址。实验结题后，实验报告、检测结果可在线查看或打印，并永久保留。

实验周期

致电详询

实验交付内容

1、重组载体的图谱序列信息和注释信息；菌检电泳图；测序结果；一份去内毒素质粒,质量1μg；一份大肠杆菌菌液1mL（25%甘油菌）；超过部分额外收费。

2、a.稳转细胞株/系筛选出库细胞标准：一个T25/瓶，密度80%以上，状态照片采集10X，3张/株细胞；b.病毒空载细胞株需额外收费可提供（可选）；

3、病毒包装的完整的质检报告，默认包含无菌检验、支原体、衣原体检测、qPCR滴度检测，其他如内毒素残留、BSA残留，需额外收费（可选）

4、完整的实验数据及实验报告。

5、所有实验材料免费保存1个月，继续保存请提前沟通，需额外收费，否则逾期自动清理。